细胞系和培养基选择
优先采用已建立的细胞系并从认可的贮源获取。试验只能使用无支原体污染细胞，使用前应该检测原代培养细胞是否存在支原体。推荐使用小鼠成纤维细胞或人上皮细胞，如果能证明试验的重现性和精确性，也可选择其他细胞系。使用冻存细胞时，如果有二甲亚砜或甘油等细胞保护剂，应该除去保护剂，使用前至少传代培养一次。传代培养细胞时，采用适合细胞系的酶分散法或机械分散法移出和重悬细胞。
培养基应无菌，含血清或无血清培养基应该符合选定细胞系的生长要求，培养基中可以含有对试验无不良作用的抗生素，pH值应该保持在7.2~7.4之间，且培养基的贮存条件应该经过验证才能在此条件下进行保存。
体外细胞毒性试验方法
体外细胞毒性试验具有通用性，可以适用于各种医疗器械和生物材料的评价，GB/T16886.5标准不是规定一个单一的试验方法，而是规定一个试验方案，需要在一系列试验步骤中判断，以选出最合适的试验，试验主要分三类：浸提液试验，直接接触试验和间接接触试验（琼脂扩散试验和滤膜扩散试验）。
由于医疗器械产品和材料的多样性，植入机体环境中的变异性，与机体相互作用的复杂性等因素，选择哪种方法进行体外细胞毒性评价，不同的试验人员会有不同的选择。当一个评价项目具有多个试验方法时，应考虑试验的原理、灵敏性、可选性、可定量性、重现性、试验材料的适用性及局限性等因素进行选择。例如浸提液法适合检测溶出物的毒性；直接接触法对材料的细胞毒性敏感性最高，可检测出材料微弱的细胞毒性，间接接触法中的琼脂扩散试验适合于毒性大的大批量材料筛选，滤膜扩散法适合于小分子量毒性材料的评价。以上各种方法因原理不同，各有特点，应根据试验材料本身理化性质、毒性作用强弱及其用途，正确地选择试验方法。